Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2026; 28(2):241-251
Разработать модель формирования устойчивости Candidozyma auris к флуцитозину (5-фторцитозин, 5-ФЦ) in vitro и определить ассоциированный с ней мутационный профиль.
Проведено исследование по типу адаптивной лабораторной эволюции на 7 клинических штаммах C. auris южноазиатской клады, выделенных из различных медицинских организаций России. Штаммы подвергали ступенчатой селекции возрастающими концентрациями 5-ФЦ с молекулярной верификацией в контрольных точках. Минимальные подавляющие концентрации (МПК) определяли методом микроразведений. Кодирующие последовательности генов FUR1, FCY1 и FCY2 секвенировали по Сэнгеру и сравнивали с референсным штаммом B8441. Дополнительно оценивали «стоимость устойчивости» по площади под кривой роста (AUC) в стандартных и субингибирующих условиях.
Во всех 7 штаммах устойчивость формировалась быстро и воспроизводимо: уже к пассажу P10 МПК 5-ФЦ повышалась до > 64 мг/л и сохранялась до P30. Замена в FCY1 (S70R) выявлена во всех родительских штаммах и не связана с адаптивными изменениями. У резистентных вариантов обнаружены мутации в FUR1 (G68, L168F, E182Q) и FCY2 (Y353, G317*). В отдельных линиях МПК 5-ФЦ превышала 64 мг/л при отсутствии новых мутаций в указанных генах. Варианты P30 демонстрировали более низкие значения AUC по сравнению с родительскими штаммами в отсутствие препарата и более высокие – при субингибирующей концентрации 5-ФЦ.
Экспериментальная селекция C. auris в присутствии 5-ФЦ приводила к быстрому и воспроизводимому формированию высокого уровня МПК > 64 мг/л. Резистентный фенотип возникал независимо в нескольких линиях и был связан с различными изменениями генов метаболического пути 5-ФЦ, что указывает на генетическую вариабельность механизмов адаптации. В отсутствие препарата приобретенная устойчивость сопровождалась снижением ростовой активности, отражающим ее биологическую стоимость. Однако субингибирующая концентрация 5-ФЦ изменяла соотношение приспособленности в пользу устойчивых вариантов. Таким образом, сохраняющееся воздействие низких концентраций препарата может поддерживать отбор резистентных субпопуляций C. auris, несмотря на снижение их исходного ростового потенциала.