Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2021; 23(2):166-172
Определить концентрации колистина, предотвращающие селекцию колистинорезистентных мутантов K. pneumoniae, и оценить влияние антибиотиков разных групп на возникновение мутационной устойчивости к колистину.
Для 88 штаммов K. pneumoniae методом последовательных микроразведений в бульоне определены минимальные подавляющие концентрации (МПК) колистина и выполнена детекция генов карбапенемаз. Селекция колистинорезистентных субпопуляций проведена на сбалансированном по содержанию катионов агаре Мюллера – Хинтон (МХА) с добавлением 16 мг/л колистина. Минимальная концентрация колистина, предотвращающая селекцию мутаций (mutant prevention concentration, MPC), определена на МХА, содержащем 0, 1, 2, 4, 8, 16, 32, 64 и 128 мг/л колистина. Дополнительно определены MPC колистина в присутствии фиксированной концентрации второго антибиотика: кларитромицина (2 мг/л), азитромицина (2 мг/л), рифампицина (1 мг/л), клиндамицина (0,5 мг/л), меропенема (8 мг/л), линезолида (2 мг/л), амикацина (1 мг/л), ванкомицина (2 мг/л), доксициклина (2 мг/л).
Все штаммы сохраняли чувствительность к колистину (МПК 0,06–1,0 мг/л). Устойчивость к меропенему (МПК > 8 мг/л) выявлена у 48 штаммов (54,5%), из них 46 являлись продуцентами карбапенемаз: KPC – 6 штаммов (6,8%), OXA-48 – 26 штаммов (29,5%), NDM – 14 штаммов (15,9%). Рост колоний на МХА с 16 мг/л колистина наблюдался для 96,6% штаммов, частота возникновения мутационной устойчивости составила от 6 × 10-9 до 10-6 (медиана 2 × 10-7). Мутационная природа устойчивости к колистину подтверждена для 36,4% штаммов. Значения MPC колистина находились в диапазоне 16–256 мг/л (MPC50 32 мг/л, MPC90 256 мг/л) и значительно (в 32–1024 раза) превосходили значения МПК. В присутствии 1 мг/л рифампицина MPC колистина снижались в 4–64 раза (MPC50 4 мг/л, MPC90 4 мг/л). В присутствии 2 мг/л доксициклина MPC колистина снижались в 2–64 раза для всех штаммов (MPC50 8 мг/л, MPC90 16 мг/л). Присутствие линезолида (2 мг/л) и ванкомицина (2 мг/л) значимо не изменяло MPC колистина. Меропенем в концентрации 8 мг/л не оказывал значимого влияния на MPC колистина для карбапенемазопродуцирующих штаммов K. pneumoniae. Ни один из антибиотиков не снижал MPC50 колистина до его клинически достижимых сывороточных концентраций.
Выявлена высокая частота формирования мутационной устойчивости к колистину у K. pneumoniae. Значения MPC колистина находятся за пределами его клинически достижимых сывороточных концентраций и могут снижаться в присутствии других антибиотиков.