Аннотация
Mycoplasma pneumoniae — возбудитель заболеваний верхних и нижних дыхательных путей, передается воздушно-капельным путём, вызывая вспышки пневмонии преимущественно в закрытых коллективах. Лечение заболеваний, вызванных M. pneumoniae, в соответствии с рекомендациями должно проводиться антимикробными препаратами группы макролидов. Однако в последнее время данные зарубежных публикаций свидетельствуют о появлении и распространении устойчивости M. pneumoniae к макролидным антибиотикам, которая связана с мутациями в гене 23S рРНК, главным образом, в позициях 2063, 2064 и 2617 (нумерация по M. pneumoniae). Выявление соответствующих однонуклеотидных замен позволяет эффективно предсказать фенотип устойчивости к макролидам, однако используемые с этой целью методы являются трудоёмкими и дорогостоящими. Настоящее исследование посвящено разработке и валидации нового метода определения мутаций, ассоциированных с устойчивостью к макролидам у M. pneumoniae, а также его использованию для анализа клинических образцов, полученных от 31 пациента с пневмонией, находящихся на лечении в военном госпитале. При исследовании клинических образцов у четырёх пациентов обнаружены характерные для фенотипа резистентности последовательности 23S рРНК M. pneumoniae. Макролидрезистентный генотип A2063G был выявлен у двух M. pneumoniae-положительных военнослужащих. Нуклеотидная замена в позиции A2064G была идентифицирована у одного пациента. Редкий вариант мутации в гене 23S рРНК M. pneumoniae, соответствующий генотипу C2617G, обнаружили у одного пациента. В одном случае была выявлена смешанная популяция клеток «дикого» типа и «мутантного» варианта M. pneumoniae. Разработанный молекулярно-генетический подход обладает хорошей дискриминирующей возможностью для выявления и дифференциации «диких» и резистентных генотипов M. pneumoniae непосредственно в клиническом материале, может быть использован для быстрого выявления мутаций и прогнозирования возможной устойчивости респираторных микоплазм к макролидным антибиотикам, а также являться дополнительным инструментом в тактике подбора адекватной терапии.
НИИ антимикробной химиотерапии ФГБОУ ВО СГМУ Минздрава России, Смоленск, Россия
НИИ антимикробной химиотерапии ФГБОУ ВО СГМУ Минздрава России, Смоленск, Россия
НИИ антимикробной химиотерапии ФГБОУ ВО СГМУ Минздрава России, Смоленск, Россия
ФГКУ «Главный военный клинический госпиталь им. акад. Н.Н. Бурденко», Москва, Россия
ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России, Москва, Россия
ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России, Москва, Россия
ФГКУ «Главный военный клинический госпиталь им. акад. Н.Н. Бурденко», Москва, Россия
НИИ антимикробной химиотерапии ФГБОУ ВО СГМУ Минздрава России, Смоленск, Россия
-
1.
Community-acquired pneumonia in adults: practical recommendations for diagnosis, treatment and prevention. Chuchalin A.G., ed. M.: Medicina, 2010. 107 p. Russian. (Внебольничная пневмония у взрослых: практические рекомендации по диагностике, лечению и профилактике. Под ред. акад. РАМН Чучалина А.Г. М.: Медицина, 2010. 107 с.).
-
2.
Kuchmin A.N., Akimkin V.G., Sinopalnikov A.I. Diagnostics, treatment and prevention of community-acquired pneumonia among military personnel of the Ministry of Defence of Russian Federation. Methodology guidelines GVMU MO RF. M.: GVKG im. N.N. Burdenko. 2010. 66 p. Russian. (Кучмин А.Н., Акимкин В.Г., Синопальников А.И. Диагностика, лечение и профилактика внебольничной пневмонии у военнослужащих МОРФ. Методические указания ГВМУ МО РФ. М.: ГВКГ им. Н.Н. Бурденко. 2010. 66 с.).
-
3.
Zhogolev S.D., Ogarkov P.I., Zhogolev K.D., et al. Epidemiology and prevention of community-acquired pneumonia among military personnel. Voenno-medicinskij zhurnal. 2013;11:55-60. Russian. (Жоголев С.Д., Огарков П.И., Жоголев К.Д. и соавт. Эпидемиология и профилактика внебольничной пневмонии у военнослужащих. Военно-медицинский журнал. 2013;11:55-60.).
-
4.
Bobylev A.A., Rachina S.A., Edelstein I.A., et al. Description of the outbreak of Mycoplasma pneumoniae infection in the Smolensk region. Pul'monologija. 2013;5:97-100. Russian. (Бобылев А.А., Рачина С.А., Эйдельштейн И.А. и соавт. Описание вспышки инфекции, вызванной Mycoplasma pneumoniae, в Смоленской области. Пульмонология. 2013;5:97-100.)
-
5.
Community-acquired pneumonia in adults: practical recommendations for diagnosis, treatment and prevention. Chuchalin A.G., ed. M.: Medicina, 2010. 107 p. Russian. (Внебольничная пневмония у взрослых: практические рекомендации по диагностике, лечению и профилактике. Под ред. акад. РАМН Чучалина А.Г. М.: Медицина, 2010. 107 с.).
-
6.
Ovchinnikov Ju.V., Zajcev A.A., Sinopalnikov A.I. Diagnosis, treatment and vaccine prophylaxis of community-acquired pneumonia among military personnel. Methodology guidelines GVMU MO RF. M.: GVKG im. N.N. Burdenko. 2015. 66 p. Russian. (Овчинников Ю.В., Зайцев А.А., Синопальников А.И. и соавт. Диагностика, лечение и вакцинопрофилактика внебольничной пневмонии у военнослужащих. Методические указания ГВМУ МО РФ. М.: ГВКГ им. Н.Н. Бурденко 2015. 61с.).
-
7.
Hantz S., Garnier F., Peuchant O., et al. Multilocus variable-number tandem-repeat analysis-confirmed emergence of a macrolide resistanceassociated mutation in Mycoplasma pneumoniae during macrolide therapy for interstitial pneumonia in an immunocompromised child. J Clin Microbiol. 2012;50(10):3402-3405.
-
8.
Mulholland S., Gavranich J., Gillies M., et al. Antibiotics for community-acquired lower respiratory tract infections secondary to Mycoplasma pneumoniae in children. Cochrane Database Syst Rev. 2012;12(9):CD004875.
-
9.
Dumke R., Stolz S., Jacobs E., et al. Molecular characterization of macrolide resistance of a Mycoplasma pneumoniae strain that developed during therapy of a patient with pneumonia. International Journal of Infectious Diseases. 2014;29:197-199.
-
10.
Li X., Atkinson T., Hagood J., et al. Emerging macrolide resistance in Mycoplasma pneumoniae in children: detection and characterization of resistant isolates. Pediatric Infectious Diseases Journal. 2009;28(8):693696.
-
11.
Averbuch D., Hidalgo-Grass C., Moses A., et al. Macrolide resistance in Mycoplasma pneumoniae, Israel, 2010. Emerg Infect Dis. 2011;17(6):10791082.
-
12.
Bébéar C.M., Pereyre S. Mechanisms of drug resistance in Mycoplasma pneumoniae. Curr Drug Targets Infect Disord. 2005;5(3):263-271.
-
13.
Clinical and Laboratory Standards Institute. 2011. Methods for antimicrobial susceptibility testing of human mycoplasmas. Approved Guideline M43-A. Clinical and Laboratory Standards Institute, Wayne, PA.
-
14.
Dumke R., von Baum H., Lück P., et al. Occurrence of macrolide-resistant Mycoplasma pneumoniae strains in Germany. Clin Microbiol Infect. 2010;16(6):613-616.
-
15.
Li SL, Sun HM, Zhu BL, et al. Whole Genome Analysis Reveals New Insights into Macrolide Resistance in Mycoplasma pneumoniae. Biomed Environ Sci. 2017;30(5):343-350.
-
16.
Spuesens E., Meijer A., Bierschenk D., et al. Macrolide resistance determination and molecular typing of Mycoplasma pneumoniae in respiratory specimens collected between 1997 and 2008 in The Netherlands. J Clin Microbiol. 2012;50(6):1999-2004.
-
17.
Peuchant O., Ménard A., Renaudin H., et al. Increased macrolide resistance of Mycoplasma pneumoniae in France directly detected in clinical specimens by real-time PCR and melting curve analysis. J Antimicrob Chemother. 2009;64(1):52-58.
-
18.
Edelstein I.A., Edelstein M.V., Romanov A.V., et al. Detection of macrolideresistance mutations in 23S rRNA gene of Mycoplasma pneumoniae using a novel real-time PCR assay. Tihookeanskij medicinskij zhurnal. 2015;1:63-66. Russian. (Эйдельштейн И.А., Эйдельштейн М.В., Романов А.В. и соавт. Выявление мутаций устойчивости к макролидам в гене 23S рРНК Mycoplasma pneumoniae с помощью полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. Тихоокеанский медицинский журнал. 2015;1:63-66.).
-
19.
Edelstein I.I., Edelstein M.V., Romanov A.V., et al. Evaluation of Prevalence of Classical Fluoroquinolone Resistance Mechanisms in Chlamydia trachomatis Due to Mutations in the Topoisomerase Genes. Klinicheskaja mikrobiologija i antimikrobnaja himioterapija. 2014;16(4):301-307. Russian. (Эйдельштейн И.И., Эйдельштейн М.В., Романов А.В. и соавт. Оценка распространенности «классических» механизмов устойчивости к фторхинолонам у Chlamydia trachomatis связанных с мутациями в генах топоизомераз. Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2014;16(4):301-307.).
-
20.
Touati A., Peuchant O., Jensen J.S. Direct detection of macrolide resistance in Mycoplasma genitalium isolates from clinical specimens from France by use of real-time PCR and melting curve analysis. J Clin Microbiol. 2014;52(5):1549-1555.
-
21.
Kannan K., Mankin A.S. Macrolide antibiotics in the ribosome exit tunnel: species-specific binding and action. Ann N Y Acad Sci. 2011;1241:33-47.
-
22.
Wierzbowski A.K., Nichol K., Laing N. Macrolide resistance mechanisms among Streptococcus pneumoniae isolated over 6 years of Canadian Respiratory Organism Susceptibility Study (CROSS) (1998-2004). J Antimicrob Chemother. 2007;60(4):733-740.
-
23.
Descours G., Ginevra C., Jacotin N. Ribosomal Mutations Conferring Macrolide Resistance in Legionella pneumophila. Antimicrob Agents Chemother. 2017;23:61(3).
-
24.
Ishiguro N., Koseki N., Kaiho M. Regional Differences in Prevalence of Macrolide Resistance among Pediatric Mycoplasma pneumoniae Infections in Hokkaido, Japan. Jap J Infect Dis. 2016;69(3):186-190.
-
25.
Pereyre S., Goret J., Bébéar C. Mycoplasma pneumoniae: Current Knowledge on Macrolide Resistance and Treatment. Frontiers Microbiol. 2016;7:974.
-
26.
Spuesens E., Hoogenboezem T., Sluijter M., et al. Macrolide resistance determination and molecular typing of Mycoplasma pneumoniae by pyrosequencing. J Microbiol Methods. 2010;82(3):214-222.
-
27.
Mayumi M., Mitsuo N., Norio O., et al. Characterization and Molecular Analysis of Macrolide-Resistant Mycoplasma pneumoniae Clinical Isolates Obtained in Japan. Antimicrob Agents Chemother. 2004;48(12):46244630.