Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2024; 26(4):439-451
Разработка критериев интерпретации и оценки качества результатов определения чувствительности представителей порядка Enterobacterales и P. aeruginosa к цефепиму-сульбактаму.
В исследование включено 1035 клинических изолятов порядка Enterobacterales и 407 P. aeruginosa, выделенных в 2023 г. в медицинских организациях 30 субъектов РФ от госпитализированных пациентов с нозокомиальными и внебольничными инфекциями. Определение МПК цефепима и цефепима-сульбактама проводили методом микроразведений в бульоне Мюллера-Хинтон II в соответствии со стандартом ISO 20776-1:2019 / ГОСТ Р ИСО 20776-1-2022. Определение МПК проводили в диапазонах концентраций цефепима: 0,06–64 мг/л для Enterobacterales, 0,125– 128 мг/л для P. aeruginosa, без сульбактама, а также в присутствии фиксированной концентрации сульбактама – 4 мг/л. Тестирование проводили в 25 сетах одновременно с тестированием контрольных штаммов – E. coli ATCC 25922, K. quasipneumoniae ATCC 700603 и P. aeruginosa ATCC 27853 (в 5 независимых повторах для каждого штамма в каждом сете). Определение чувствительности к цефепиму-сульбактаму диско-диффузионным методом проводили с использованием агара Мюллера-Хинтон и дисков, содержащих комбинацию цефепима и сульбактама (30 + 10 мкг, Lot No. 111123002, Liofilchem S.r.l., Италия) по стандартной методике EUCAST. Определение значений зоны подавления роста (ЗПР) осуществляли в 3 повторах для всех клинических изолятов и в 5 повторах для каждого контрольного штамма. Для анализа распределений значений МПК и ЗПР использовали стандартные методы описательной статистики и средства построения диаграмм Microsoft Excel. Расчет пограничных значений ЗПР для определения клинических категорий чувствительности к цефепиму-сульбактаму проводили путем построения отрицательной линейной регрессии, отражающей зависимость между значениями log2(МПК) и ЗПР, и определения значений ЗПР, соответствующих пограничным значениям МПК цефепима, установленным EUCAST.
Для двух наиболее распространенных видов Enterobacterales (E. coli и K. pneumoniae) установлены близкие значения коэффициентов регрессии и хорошая отрицательная корреляция значений МПК и ЗПР (R2 > 0,8). Субанализ данных распределения значений МПК и ЗПР для прочих видов Enterobacterales показал наличие низкой корреляции (R2 = 0,4947) между данными параметрами у видов, продуцирующих природные AmpC цефалоспориназы: C. freundii, E. cloacae complex spp., H. alvei, K. aerogenes, M. morganii, Providencia spp. и Serratia spp. (изоляты, относящиеся к данным видам были исключены из последующего анализа). Финальная выборка для расчета пограничных значений ЗПР цефепима-сульбактама для Enterobacterales включала 890 изолятов (2670 сопоставлений), относящихся к 9 видам: C. koseri, E. coli, K. oxytoca, K. pneumoniae, P. mirabilis, P. penneri, P. vulgaris, R. ornithinolytica и S. enterica. Значение R2 линейной регрессии составило 0,8912. Рассчитанные пограничные значения ЗПР: Ч ≥ 26 мм, Р < 22 мм. Область значений (22–25 мм), совпадающая с клинической категорией «У», отмечена также как «зона технической неопределенности – ЗТН» в соответствии с определением EUCAST, поскольку включает значительное число изолятов, которые могут быть отнесены к разным категориям при определении чувствительности с помощью ДДМ и на основании оценки МПК. Для P. aeruginosa Значение R2 линейной регрессии составило 0,8131; рассчитанное пограничное значение ЗПР – Р < 25 мм; зона технической неопределенности – 24–27 мм. Для контрольных штаммов: значения ЗПР K. quasipneumoniae ATCC 700603 отличались не более чем на 4 мм (диапазон: 25–28; среднее: 27,6; медиана: 28 мг/л); E. coli ATCC 25922 – не более чем на 2 мм (диапазон: 33–35; среднее: 34,7; медиана: 35 мг/л); P. aeruginosa ATCC 27853 – не более чем на 2 мм (диапазон: 31–33; среднее: 31,9; медиана: 32 мг/л).
Разработанные критерии интерпретации и оценки качества результатов определения чувствительности к цефепиму-сульбактаму могут быть рекомендованы для утверждения и включения в Российские рекомендации «Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам».