Генетические механизмы устойчивости Candidozyma auris к флуцитозину, индуцированной in vitro

Thu, 20 Aug 2026 15:19:56 +0000

Цель.

Разработать модель формирования устойчивости Candidozyma auris к флуцитозину (5-фторцитозин, 5-ФЦ) in vitro и определить ассоциированный с ней мутационный профиль.

Материалы и методы.

Проведено исследование по типу адаптивной лабораторной эволюции на 7 клинических штаммах C. auris южноазиатской клады, выделенных из различных медицинских организаций России. Штаммы подвергали ступенчатой селекции возрастающими концентрациями 5-ФЦ с молекулярной верификацией в контрольных точках. Минимальные подавляющие концентрации (МПК) определяли методом микроразведений. Кодирующие последовательности генов FUR1, FCY1 и FCY2 секвенировали по Сэнгеру и сравнивали с референсным штаммом B8441. Дополнительно оценивали «стоимость устойчивости» по площади под кривой роста (AUC) в стандартных и субингибирующих условиях.

Результаты.

Во всех 7 штаммах устойчивость формировалась быстро и воспроизводимо: уже к пассажу P10 МПК 5-ФЦ повышалась до > 64 мг/л и сохранялась до P30. Замена в FCY1 (S70R) выявлена во всех родительских штаммах и не связана с адаптивными изменениями. У резистентных вариантов обнаружены мутации в FUR1 (G68, L168F, E182Q) и FCY2 (Y353, G317*). В отдельных линиях МПК 5-ФЦ превышала 64 мг/л при отсутствии новых мутаций в указанных генах. Варианты P30 демонстрировали более низкие значения AUC по сравнению с родительскими штаммами в отсутствие препарата и более высокие – при субингибирующей концентрации 5-ФЦ.

Выводы.

Экспериментальная селекция C. auris в присутствии 5-ФЦ приводила к быстрому и воспроизводимому формированию высокого уровня МПК > 64 мг/л. Резистентный фенотип возникал независимо в нескольких линиях и был связан с различными изменениями генов метаболического пути 5-ФЦ, что указывает на генетическую вариабельность механизмов адаптации. В отсутствие препарата приобретенная устойчивость сопровождалась снижением ростовой активности, отражающим ее биологическую стоимость. Однако субингибирующая концентрация 5-ФЦ изменяла соотношение приспособленности в пользу устойчивых вариантов. Таким образом, сохраняющееся воздействие низких концентраций препарата может поддерживать отбор резистентных субпопуляций C. auris, несмотря на снижение их исходного ростового потенциала.

FUR1 on КМАХ

Генетические механизмы устойчивости Candidozyma auris к флуцитозину, индуцированной *in vitro*

Цель.

Материалы и методы.

Результаты.

Выводы.

Генетические механизмы устойчивости Candidozyma auris к флуцитозину, индуцированной in vitro